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告别SDS-PAGE,Turbo CE-SDS让蛋白分析更加快、准、稳!
[ 发布日期:2025-6-25 16:36:41    阅读次数:36 ]
 在生物制药研发与质控领域,蛋白质的精确分析是确保药物安全性和有效性的关键步骤。传统 SDS-PAGE 凝胶电泳虽广泛应用,但其耗时费力、重现性差等问题始终困扰着研发人员。如今,毛细管电泳-十二烷基硫酸钠(CE-SDS)技术凭借高效、精准、自动化的优势,正在成为新一代蛋白质分析的 “金标准”。


本文将通过分析单克隆抗体、病毒衣壳蛋白,对比Maurice系统Turbo CE-SDS与传统SDS-PAGE两种方法的数据质量、灵敏度及重现性,展示Turbo CE-SDS如何实现蛋白分析的“智能升级”! 



效率革新:Turbo CE-SDS 

让蛋白分析实现高效自动化


传统SDS-PAGE需手动制胶、染色、脱色,耗时长达数小时,且产生大量有害废液(图1)。

Maurice Turbo CE-SDS通过全自动工作流程,仅需65分钟即可完成12个样本分析,且废液量大大减少,大幅提升实验室效率与环保性。


图1 SDS-PAGE与CE-SDS工作流对比



高灵敏度与精准定:CE-SDS 

精准解析蛋白杂质与修饰


Maurice Turbo CE-SDS的分辨率远超凝胶电泳,能够检测到SDS-PAGE无法分辨的微弱峰和次要修饰,提供更高的分离和定量精度。  

以单抗药物Belimumab为例,图 2A和2B分别展示了Belimumab使用Maurice Turbo CE-SDS方法在非还原和还原条件下生成的电泳图谱,所显示的峰对应于凝胶电泳结果中的各种条带。在非还原条件下,CE-SDS不仅清晰显示主峰,还检测到3个次要峰Peak1-Peak3(图2A),而SDS-PAGE凝胶检测不到(图2C)。在还原条件下CE-SDS生成的电泳图显示出分辨良好的轻链(LC)和重链(HC),以及其他小峰。这些微量杂质可能影响药物稳定性与疗效,CE-SDS为生物类似药开发提供了关键的质控依据。


图2 非还原与还原条件下单抗Belimumab的CE-SDS和SDS-PAGE分析结果


Maurice的CE-SDS还可用于AAV病毒衣壳蛋白的定量分析。如图3所示,CE-SDS能够清晰区分AAV8与AAV9的VP1/VP2/VP3组成,并检测到低分子量(LMW)杂质与修饰产物(如VP3a),为基因治疗产品的质量控制提供全面支持。


图3  AAV8与AAV9的CE-SDS电泳图



零学习成本:Compass 软件

让数据解读无缝衔接


Compass for iCE软件的Lane View功能可以将实验得到的电泳图谱以类似传统凝胶图的形式展示出来,无缝衔接传统数据解读习惯,使得数据分析更加直观易懂,且与传统电泳结果直接对标。

图4 AAV样品的Compass for iC产生的凝胶图(左)与SDS-PAGE凝胶(右)



优越的重现性:CE-SDS

突破传统电泳的批次变异瓶颈


Turbo CE-SDS通过定量峰积分取代定性条带强度评估,显著降低了实验间的变异性通过对比Belimumab在Maurice Turbo CE-SDS连续34次进样与SDS-PAGE 12条泳道的数据,发现非还原条件下,CE-SDS的总峰面积相对标准偏差(%RSD)仅为1.04%,而SDS-PAGE高达23.56%(图5)。还原条件下,Turbo CE-SDS的LC和HC的峰面积百分比的%RSD也远低于SDS-PAG(图6),表明CE-SDS具有更高的定量重现性。同样在AAV8与AAV9的样本分析中也证明了这一点。


图5 Belimumab的Maurice Turbo CE-SDS和SDS-PAGE总峰面积重现性的比较(非还原条件下)


图6单抗 Belimumab的Maurice Turbo CE-SDS和SDS-PAGE的峰面积百分比重现性的比较(还原条件下)


 还在固守 SDS-PAGE?

——技术革新正当时 

将Maurice Turbo CE-SDS 与 SDS-PAGE 同步用于单克隆抗体和 AAV 样本分析,数据已经证实 CE-SDS 以更快速度、更高精度和更强重现性实现蛋白分析新突破!


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