3.动物疫病多重检测
多重PCR技术一次扩增反应即可实现对多种病原体进行检测，相较单重检测而言成本显著降低。但是仍然存在许多影响多重PCR扩增与检测效果的因素，其中多个靶标扩增效率的一致性是最大的难题，检测重数越多，效率一致性往往越低。dRCR采用终点荧光检测和纳米微孔分区技术，检测结果不受扩增效率的影响，能准确定量和避免漏检。
目前主流品牌的dRCR仪均有多个检测通道，如罗氏诊断的Digital LightCycler数字PCR仪拥有6个检测通道，可实现6重病原检测。下图应用罗氏dRCR仪同时检测禽流感H5、H7、H9亚型和新城疫病毒4个病原，各检测通道间无干扰，定量结果准确性高。
图5 罗氏Digital LightCycler数字PCR仪多重检测
4.抗原快速诊断产品的评价
来源不同厂家的抗原快检试剂，灵敏度差异较大。dPCR可以绝对定量待测样品中的病原核酸，从而精准的评价抗原检测试剂的检测限。
5.动物疫苗研发中的应用
dPCR可对重组腺病毒疫苗等活载体疫苗进行定量，作为生产过程中质量评价、活性滴定、杂质评估的有力工具。同时，dPCR可定量动物血液中微量的病毒，可作为疫苗免疫效果评价的有效工具。
6.动物源性成分检测
世界各国每年都会有许多肉类掺假事件被曝光，包括将廉价肉掺入高价肉或添加非肉成分冒充肉及肉制品等。dPCR技术可直接对物种特异性DNA的拷贝数进行绝对定量，只需构建物种特异性DNA拷贝数与肉粉重量之间的关系曲线，即可对肉制品含量进行定量。
三、纳米微孔芯片数字PCR仪新贵
Digital LightCycler数字PCR仪是罗氏最新推出的高性能产品，充分拓展数字PCR的应用领域。
图6罗氏Digital LightCycler 数字PCR仪
罗氏Digital LightCycler仪亮点
1.应用灵活：阵列式纳米芯片技术，3种密度芯片可更换；
2.多重检测：6 重荧光多色检测，便于开发更多的应用；
3.高度自动化：分析系统整合PCR反应、芯片检测功能；
4.通量高单次检测 8-96个样本，适合科研及临床检测；
5.时间快：单块板1.5h, 八块板满载则 4h 内完成样品扩增、分析；
6.5x预混液: 更大的样品量输入；
四、结语
dPCR以明显的技术优势，已经广泛应用于核酸检测的方方面面。dRCR在病原微生物检测，肿瘤液态活检，遗传生殖检测，公共卫生检测，环境微生物检测，RNA表达检测，NGS文库定量，甲基化检测等领域都发挥着越发重要的作用。通过建立完善的dPCR检测流程，相信dPCR能让蓬勃发展的分子诊断如虎添翼。
