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[ 佰司特单分子稳定性分析系统 ]
 单分子稳定性分析系统(高通量单分子力谱测量系统)Hi-MT,采用全新的单分子磁镊(single molecular magnetic tweezers)技术,可以同时对数百个生物大分子(如DNA、RNA或蛋白等)施加亚pN至数百pN的力,从而对单个分子进行操控及力学测量。高通量单分子力谱测量系统广泛应用于蛋白结构解析、DNA/RNA与蛋白的相互作用、细胞及细胞骨架应力、小分子药物研发等领域。

Hi-MT 主要特点

★    精度高:力学精度小于0.1 pN;空间精度小于1nm;

★    通量高:单次最高可检测100个生物大分子;

★    多维度:生物大分子长度和扭转同时追踪;

 

Hi-MT 主要应用
1、DNA的力学特性

多个偶联微球的DNA分子被固定在芯片表面,施加磁力将微球向上拉伸,从而获得多个DNA分子的力-距离曲线。 
单分子力谱法如磁镊、光镊及原子力技术已经成为强大的工具,广泛应用于研究DNA酶相互作用的生物力。但是一般的单分子力谱检测方法通常只能检测一个DNA分子,非常限制数据采集分析。通过微接触印刷将DNA系留磁珠定向、非随机固定在规则阵列中DNA末端结合标签。可增加检测数量级。其中数百个微球同时被平行追踪并对相应的DNA进行力学统计分析。该技术为研究DNA-蛋白质相互作用中的罕见事件,并获得来自单个实验运行的大量统计数据集奠定了基础。
2、DNA构象变化
单分子力谱测量方法可以应用于DNA延伸。对于六个不同的DNA序列,在0.2至1.2pN的变化力下,DNA延伸表现出不同的方式。在0.3pN及以下,所有DNA的拉伸及旋转曲线都是对称的。在0.6和0.8pN的中间力下,DNA熔化和丝核形成之间的竞争的序列依赖效应最为明显。在1.2pN时,所有序列都显示出不对称的旋转曲线:施加的负超螺旋被DNA熔化吸收,施加的正超螺旋被多核体吸收。
3、RNA构象变化
单分子力谱测量方法可以同时探究数百个单个聚合酶 RNA 合成动力学,研究双链 RNA 和单链 RNA 的力学伸展曲线。在 RdRp RNA 合成过程中,CD 模板链从 AB 链上被置换下来,单链 RNA 的比例逐渐增加。由于双链 RNA 和单链 RNA 之间的伸展差异较大,选择了 25 pN 的恒定力,这为 RdRp RNA 合成提供了高空间分辨率。
4、蛋白构像解析
蛋白通过两端的DNA handles被偶联在微球和芯片表面中间。通过磁力将微球拉伸,从而导致不同的蛋白质区域展开。
5、DNA-蛋白相互作用
多个与蛋白孵育的DNA分子被拉伸。DNA分子一端偶联微球,另一端固定在芯片表面。通过对微球施力即可同时测量多个生物大分子的力-距离曲线。 
6、抗原-抗体相互作用
Hi-MT可以在单分子层面测量抗原抗体的亲和力。将抗原标记的微球与抗体结合连接玻璃表面。用逐渐上升的力使微球远离玻璃表面同时测量微球位置,即可计算抗原抗体的相互作用力。 

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